高考生物選修一復(fù)習(xí)手冊
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高考生物選修一復(fù)習(xí)手冊(一)
分離分解纖維素的微生物的實驗流程:
土壤取樣→選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落
(1)土壤采集 選擇富含纖維素的環(huán)境。
(2)剛果紅染色法分離纖維素分解菌的步驟 倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板
(3)剛果紅染色法種類
一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進行顏色反應(yīng),另一種是在倒平板時就加入剛果紅。
植物組織培養(yǎng)的基本過程:
細胞分化:在生物個體發(fā)育過程中,細胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。
離體的植物組織或細胞,在培養(yǎng)了一段時間以后,會通過細胞分裂,形成愈傷組織,愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞。
由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程,稱為植物細胞的脫分化,或者叫做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng),又可以重新分化成根或芽等器官,這個過程叫做再分化。再分化形成的試管苗,移栽到地里,可以發(fā)育成完整的植物體。
植物細胞工程:具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞,都具有發(fā)育成完整個體的能力,即每個生物細胞都具有全能性。但在生物體的生長發(fā)育過程中并不表現(xiàn)出來,這是因為在特定的時間和空間條件下,通過基因的選擇性表達,構(gòu)成不同組織和器官。
植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有:實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖;培育脫毒作物;制作人工種子;培育作物新品種以及細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等。
細胞分化是一種持久性的變化,它的生理意義是:使多細胞生物體中細胞結(jié)構(gòu)和功能趨向?qū)iT化,有利于提高各種生理功能的效率。
高考生物選修一復(fù)習(xí)手冊(二)
影響植物組織培養(yǎng)的條件:
材料:不同的植物組織,培養(yǎng)的難易程度差別很大。植物材料的選擇直接關(guān)系到試驗的成敗。植物的種類、材料的年齡和保存時間的長短等都會影響實驗結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝作材料。
一般來說,容易進行無性繁殖的植物容易進行組織培養(yǎng)。選取生長旺盛嫩枝進行組培的是嫩枝生理狀態(tài)好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。
營養(yǎng):離體的植物組織和細胞,對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊,需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基,其中含有的大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg,微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co,有機物有甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等。
激素:植物激素中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長素存在的情況下,細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強趨勢。在培養(yǎng)基中需要添加生長素和細胞分裂素等植物激素,其濃度、使用的先后順序、用量的比例等都影響結(jié)果。
配制MS固體培養(yǎng)基:
配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成的濃縮液(培養(yǎng)基母液)。
使用時根據(jù)母液的濃縮倍數(shù),計算用量,并加蒸餾水稀釋。
配制培養(yǎng)基:應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機物和植物激素的母液,并用蒸餾水定容到1000毫升。
在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加植物激素。
原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。
滅菌:采取的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。
MS培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用是什么?與肉湯培養(yǎng)基相比,MS培養(yǎng)基有哪些特點?
答:大量元素和微量元素提供植物細胞所必需的無機鹽;蔗糖提供碳源,維持細胞滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。
微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主,MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)。
高考生物選修一復(fù)習(xí)手冊(三)
外植體的消毒:
外植體:用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。
選取菊花莖段時,要取生長旺盛的嫩枝。菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉,用軟刷輕輕刷洗,刷洗后在流水下沖洗20min左右。
用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分,放入體積分數(shù)為70%的酒精中搖動2~3次,持續(xù)6~7s,立即將外植體取出,在無菌水中清洗。
取出后仍用無菌吸水紙吸干外植體表面水分,放入質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中1~2min。取出后,在無菌水中至少清洗3次,漂洗消毒液。
注意:對外植體進行表面消毒時,就要考慮藥劑的消毒效果,又要考慮植物的耐受能力。
接種:接種過程中插入外植體時形態(tài)學(xué)上端朝上,每個錐形瓶接種7~8個外植體。外植體接種與細菌接種相似,操作步驟相同,而且都要求無菌操作。
培養(yǎng):應(yīng)該放在無菌箱中進行,并定期進行消毒,保持適宜的溫度(18~22℃)和光照(12h)。
移栽:栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的封口膜,讓其在培養(yǎng)間生長幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時間,進行壯苗。最后進行露天栽培。
栽培:
外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染,原因有外植體消毒不徹底;培養(yǎng)基滅菌不徹底;接種中被雜菌污染;錐形瓶密封性差等。
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