高二下冊生物菊花的組織培養(yǎng)實驗操作知識點

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　　高二下冊生物菊花的組織培養(yǎng)實驗操作知識點

　　(一)制備MS固體培養(yǎng)基

　　1、配置各種母液

　　2、配置培養(yǎng)基①定容② 調PH

　?、叟囵B(yǎng)基的分裝3、滅菌分裝好的培養(yǎng)基連同其他器械一起進行高壓蒸汽滅菌

　　1、選材：菊花莖段，取生長旺盛的嫩枝

　　(二)外植體消毒

　　2、消毒：

　　流水沖洗—酒精—無菌水沖洗—氯化汞—無菌水沖洗至少三次之上

　　(三)接種

　　用70%的酒精噴霧使空氣消毒， 酒精或新潔爾滅搽洗工作臺并用紫外線照射20分鐘

　　1、接種室消毒

　　2、無菌操作要求

　　操作要在酒精燈火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌，接種后立即蓋好瓶蓋。

　　3、材料的切取和接種

　　4、接種注意事項

　?、倜拷臃N一塊外植體前，鑷子需放入體積分數為75%的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精燈火焰上燒一遍，冷卻后再接種

　?、谕庵搀w在培養(yǎng)基中要分布均勻，放置外植體數量根據錐形瓶的大小確定，一般胡蘿卜3-4塊，菊的莖或葉6-8塊，也不要太少，以充分利用培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分和光照條件

　?、鄄迦霑r應注意方向，不要倒插。莖段、莖尖基部插入培養(yǎng)基利于吸收水分和養(yǎng)分

　　(四)培養(yǎng)

　　無菌箱中培養(yǎng)，定期消毒，保持適宜的溫度，光照

　　(五)移栽

　　1、打開封口膜

　　2、清洗轉移至消過毒的蛭石或珍珠巖中幼苗長壯后，移栽到土壤中

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