食用菌母種制作視頻
母種是從子實體中提純,復(fù)壯獲得母種,人工栽培蘑菇成功的關(guān)鍵是菌種,只有優(yōu)良的菌種才能達(dá)到優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)。下面小編給大家分享了食用菌母種制作視頻及制作技術(shù),一起來了解一下吧!
食用菌母種制作視頻
常見食用菌品種母種制作技術(shù)
一、常見母種培養(yǎng)基有以下幾種:
1.PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯200g、瓊脂1820g、葡萄糖20克g,水1000ml,pH自然。此培養(yǎng)基廣泛適用于各種菇類,但不適合草菇、猴頭菇菌絲的生長。
2.馬鈴薯綜合培養(yǎng)基:馬鈴薯200g、瓊脂20g、葡萄糖20g,磷酸二氫鉀1.5g,硫酸鎂1.5 g,維生素B15~10g,水1000ml,pH自然。此配方適合雞腿菇、平菇、雙孢蘑菇、金針菇、草菇等菇類菌絲生長。如在配方中加入蛋白胨20g,猴頭菇菌絲生長會更加旺盛、粗壯。
二、母種培養(yǎng)基的制作方法如下:
1.浸煮容器
一般選用玻璃容器、不銹鋼鍋或鋁鍋、搪瓷鍋等,生產(chǎn)中不能用鐵鍋、銅鍋,以免鐵銹、銅銹混進培養(yǎng)基。
2.配制方法
先按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量培養(yǎng)基的各種成分,再進行配制。以配制馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基為例,介紹其培養(yǎng)基配制方法如下。
選整齊且沒有芽變(芽變綠)的馬鈴薯,洗凈去皮并挖掉芽眼,切成薄片,稱取200g放入容器內(nèi),加入1 000ml水,加熱煮開15~30分鐘,至酥而不爛的程度,用四層紗布過濾(見圖1所示),取其濾液,加開水補足1 000ml。然后在煮汁中加入稱量好的瓊脂,用小火加熱,并不斷用玻璃棒攪拌,至瓊脂全部融化,再用紗布過濾一次,倒入量杯,用開水補足1 000ml。再加入葡萄糖(或蔗糖),用小火再煮幾分鐘并用玻璃棒不斷攪拌,待葡萄糖(或蔗糖)全部融化,?;鸬谷肓勘⒂瞄_水補足1 000ml。在配制過程中,先加入主要元素,再加入微量元素,最后加入維生素或生長素等。如需讓培養(yǎng)基清亮透明,可用紗布將煮好的培養(yǎng)基趁熱過濾一次,倒入容器,待用。
3.分裝
培養(yǎng)基配好后,應(yīng)趁熱將其分裝到試管內(nèi),以免瓊脂冷凝。分裝時應(yīng)避免培養(yǎng)基粘附在試管口,若瓊脂粘住棉塞,既影響接種又容易滋生雜菌。分裝時可用漏斗分裝,裝入試管中的量,最好不要超過試管長度的1/5,如圖2所示。
4.塞棉塞
培養(yǎng)基分入試管后,應(yīng)立即塞好棉塞。應(yīng)用普通棉花(不能用脫脂棉,因其易吸水變潮,滋生雜菌)做棉塞。棉塞塞入試管的長度應(yīng)為棉塞長度的2/3,松緊度適中,既能保持通氣又能防止雜菌污染,即用手握住棉塞,試管不能掉下,稍微用力才能把棉塞拔下為好,見圖3。
塞好棉塞后,每5支或7支包扎一捆,棉塞部分用牛皮紙或舊報紙用繩捆好。包紙的作用是防止滅菌時冷凝水淋濕棉塞,并防止接種前培養(yǎng)基水分散失或受雜菌污染。
5.滅菌及擺斜面
試管包扎好后,放入手提式高壓鍋的消毒桶內(nèi),蓋蓋滅菌。待壓力升至0.05兆帕?xí)r,打開排氣閥,放凈鍋內(nèi)冷空氣,再加壓至0.15~0.17兆帕,維持30分鐘,停止加熱。待鍋內(nèi)壓力下降為0后,先將鍋蓋打開一小縫,使熱氣溢出,停3~5分鐘后,再打開鍋蓋。利用鍋內(nèi)的余熱將棉塞烘干,防止棉塞受潮。待溫度降至60℃左右,再擺成斜面,以防止冷凝水在試管內(nèi)積聚過多。
擺放斜面時,試管塞棉塞的一頭下面墊厚1厘米的木板或鋼板等,斜面長度不要超過試管長度的1/2,待冷卻后即成斜面培養(yǎng)基,如圖4、圖5所示。
6.無菌培養(yǎng)
滅菌后的培養(yǎng)基,應(yīng)隨機抽取幾支放在25℃左右的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)2~3天,若無雜菌生長,便可做菌種使用。
三、母種的轉(zhuǎn)管與培養(yǎng)
母種的轉(zhuǎn)管培養(yǎng)即將一支長滿菌絲的試管在無菌操作下,分別轉(zhuǎn)接到多只試管中培養(yǎng)。一般每支母種可擴接30~50支,生產(chǎn)上供應(yīng)的多為子代母種。它可以再次轉(zhuǎn)管擴接。一般每支又可擴接成20~25支子代母種。母種的轉(zhuǎn)管與培養(yǎng)需注意兩個關(guān)鍵問題,一是轉(zhuǎn)管接種箱要嚴(yán)格消毒,二是轉(zhuǎn)管次數(shù)不宜過多,因轉(zhuǎn)管代數(shù)過多易使菌種生活力降低,轉(zhuǎn)管次數(shù)在4次以內(nèi)為宜。
1.接種箱消毒
首先用金星消毒液或其他消毒藥品,把接種箱內(nèi)擦拭干凈,然后放入分離所得的母種和試管培養(yǎng)基、接種工具、酒精燈、火柴及盛放高錳酸鉀與福爾馬林反應(yīng)的碗(按福爾馬林10ml/m3+高錳酸鉀5g放入所盛碗內(nèi)),立即封閉接種箱,讓其發(fā)生反應(yīng),密閉熏蒸30分鐘。也可用煙霧消毒盒5~6g/m3,密閉熏蒸30分鐘。
2.轉(zhuǎn)管
操作者在轉(zhuǎn)管前,應(yīng)穿好工作服,剪好指甲,洗凈手。將手通過袖筒伸入接種箱內(nèi),再用酒精棉球把手及裸露的手腕擦拭一遍。點燃酒精燈,左手持1支分離母種試管和1支斜面培養(yǎng)基,右手拿接種鉤(見圖6-a),首先將接種鉤在酒精燈外焰上灼燒滅菌,接著用右手小指和無名指把斜面母種上的棉塞在火焰上拔掉(見圖6-b、圖6-c),將接種鉤伸進斜面菌種試管,稍冷卻后,將母種斜面上的老菌塊及干燥部分挖掉,棄之不用,然后取一小塊麥粒大小(1cm×0.3cm)的菌種塊(一定要帶培養(yǎng)基)移接到斜面培養(yǎng)基的中央,抽出接種針,灼燒試管口,迅速將棉塞通過火焰烤一下塞上(見圖6-d、圖6-e、圖6-f)。在試管上貼上標(biāo)簽。以此類推。直至把接種箱內(nèi)斜面培養(yǎng)基接完為止,一般由一個人獨立完成。此操作中既要注意試管口和接種鉤始終不要離開火焰無菌區(qū),還要注意避免火焰燒死菌種。
3.培養(yǎng)
菌種接好后,直接轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱或培菌室內(nèi)培養(yǎng),溫度調(diào)節(jié)在24~28℃,并注意培養(yǎng)室內(nèi)的通風(fēng)換氣,遮掩窗戶,避免光線過強,經(jīng)常檢查,及時揀出雜菌污染的試管,確保菌種純度。菌種菌絲長滿試管后,或及時使用,或放置在4℃以下的冰箱內(nèi)低溫保藏。
值得注意的是:母種培養(yǎng)基制作過程中,嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)程進行。選好培養(yǎng)基配方,按其比例嚴(yán)格稱量原料,不可多也不可少,否則菌絲生長會受到嚴(yán)重影響。制作好的母種培養(yǎng)基,可用于母種的分離培養(yǎng)、提純復(fù)壯及轉(zhuǎn)管、保藏等。
四、純種分離
生產(chǎn)上常用組織分離法進行母種菌種的分離。組織分離法是從種菇上切去一小塊組織移接于試管斜面培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)獲得菌種的方法。該方法具有操作簡單,有利于保持原來品系的遺傳特性,成功率高等特點。
1.種菇選擇 選種菇時,應(yīng)到生長旺盛、無嚴(yán)重病蟲害的豐產(chǎn)區(qū),采取菇朵圓整、菇體潔白、菌蓋肥厚且緊密硬實、菇柄短且粗壯,具有原品種優(yōu)良性狀、6~7成熟的第二茬單生菇作為種菇。
2.種菇消毒 種菇選好后,去除表面雜質(zhì)及菌柄,用75%的酒精棉球擦試種菇表面,然后把斜面試管隨同接種工具(如接種刀、接種鏟、接種鉤、鑷子等)一同放入接種箱內(nèi),用氣霧消毒劑5g/m3點燃密閉熏蒸30分鐘。
3.分離 用消毒過的接種刀,把種菇縱剖為二,在菇蓋與菇柄連接處的部位,切取綠豆粒大小(約0.2cm×0.2cm)的菌肉,移接到斜面培養(yǎng)基的中央。然后把接好的試管放入恒溫25℃的無菌環(huán)境中培養(yǎng),2~3天后,組織塊就能長出白色菌絲,經(jīng)檢查、優(yōu)選,選出菌絲生長旺盛且無雜菌的試管,作為母種,用于生產(chǎn)或保藏。
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