基因檢測技術論文
基因是DNA分子上的一個功能片段,是遺傳信息的基本單位,是決定一切生物物種最基本的因子;下面是學習啦小編整理了基因檢測技術論文,有興趣的親可以來閱讀一下!
基因檢測技術論文篇一
病毒基因的檢測
【關鍵詞】 病毒基因 檢測
一 乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)測定
乙型肝炎是由乙肝病毒引起的以肝臟損害為主要臨床特征的急、慢性傳染病,嚴重者可 發(fā)展成慢性肝炎、肝硬化和肝癌。在我國,乙肝是危害人類健康的一種主要傳染病。
【 參考值】
陰性 (Taqman熒光定量PCR技術)
【臨床意義】
1.HBV-DNA是乙型肝炎病毒感染的直接證據(jù),是HBV有活性復制能力及具傳染性的確切標志。
2.可定量檢測HBV-DNA含量,為臨床病情判斷、療效觀察提供信息。
3.HBV-DNA的出現(xiàn)先于其他血清學指標(如HBsAg),可早期診斷HBV感染。
4.正常人HBV-DNA為陰性。當HBV-DNA為101~104拷貝/ml時,表明病毒復制水平低,傳染性較弱;而當 HBV-DNA>104拷貝/ml時,表明病毒復制水平高,傳染性強。
5.HBV-DNA含量測定可為臨床藥物選擇提供依據(jù)。
【注意事項】
1.標本可用血清或血漿,避免肝素抗凝,避免反復凍融。
2.標本室溫放置不超過4小時。
3.溶血、高膽紅素標本影響檢測結果。
二 其他病毒DNA測定
(一)人乳頭瘤病毒DNA(HPV-DNA)檢查
人乳頭瘤病毒是一種小的雙鏈DNA病毒,根據(jù)核酸相關性分型已發(fā)現(xiàn)70余型。該病毒可以感染人的皮膚和黏摸上皮細胞,誘發(fā)細胞增生,產(chǎn)生乳頭瘤樣病變。
【參考值】
陰性 (多重核酸熒光定量PCR技術)
【臨床意義】
1.HPV難以用傳統(tǒng)的病毒培養(yǎng)及血清學技術檢測,目前主要采用分子生物技術檢測HPV-DNA,靈敏度高。
2.可對尿道、陰道、宮頸脫落細胞進行人乳頭瘤病毒的檢測及分型,判斷體內(nèi)HPV感染狀況。
3.HPV 6和11型與尖銳濕疣、喉頭鱗狀上皮乳頭狀瘤發(fā)生有關;HPV 16、18、31、32型等與宮頸癌發(fā)生相關。因此,可用于對HPV高危亞型的診斷,對尖銳濕疣、宮頸癌等疾病的診斷與篩查具有重要意義。
4.HPV-DNA檢測可用于考核療效與預后。
【注意事項】
1.用無菌拭子取尿道、陰道、宮頸分泌物于無菌試管或無菌瓶中。
2.標本采集應嚴格按無菌操作,避免污染。并及時送檢。
(二)人類巨細胞病毒DNA(HCMV-DNA)檢查
HCMV是皰疹病毒科成員,人類普遍易感,多為隱性或潛伏感染。在免疫功能低下、缺陷或抑制情況下,可發(fā)生成人HCMV感染,常呈彌漫性病變,嚴重者甚至死亡。
【參考值】
陰性 (熒光探針雜交PCR技術)
【臨床意義】
1.用于臨床HCMV感染的快速診斷。
2.用于臨床免疫抑制 治療過程中體內(nèi)HCMV感染的快速診斷與療效監(jiān)測。獲得性免疫缺陷綜合征等患者HCMV感染的診斷與療效監(jiān)測。
3.PCR技術檢測HCMV的敏感性高,且HCMV-DNA的出現(xiàn)早于臨床癥狀或血清學標記物的出現(xiàn),可早期診斷 HCMV感染。
4.妊娠早期感染HCMV可引起胎兒先天畸形,產(chǎn)前檢測HCMV-DNA有利于優(yōu)生優(yōu)育。
5.連續(xù)監(jiān)測巨細胞病毒的含量變化可了解病毒的復制狀況,從而為疾病的早期診斷與藥物療效提供直接的病原學依據(jù)。
【注意事項】
采用EDTA抗凝全血或腦脊液標本,采集后及時送檢。
(三)單純皰疹病毒DNA(simplex herpes virus, HSV-DNA)
單純皰疹病毒是一種有囊膜的雙股DNA病毒,分為I型和II型。近年來,HSV是性傳播疾病、病毒性腦炎等疾病的重要病原體。
【參考值】
陰性 (熒光探針PCR技術)
【臨床意義】
1.用于檢測人血清樣本或體液樣本中的單純皰疹病毒并可同時分型,輔助診斷HSV感染性疾病。
2.HSV I型感染主要引起口唇皰疹、皰疹性結膜炎、腦炎和皮膚性皰疹,HSV II型主要引起生殖器皰疹, HSV-DNA檢測可輔助診斷上述疾病,并可用于考核療效與預后。 【注意事項】
1.血清用無菌注射針頭抽取靜脈血2ml于無菌肝功管中。
2.分泌物用無菌棉拭子采集標本,女性取宮頸或陰道分泌物,男性取精液或前列腺液,將取樣后的棉拭子放入無菌試管或無菌瓶中。
3.腦脊液抽取腦脊液于無菌玻璃瓶中。
(四)EB病毒DNA(EB virus,EBV-DNA)
EBV屬于丫皰疹病毒科,主要經(jīng)涎液傳播,PCR技術可靈敏地檢測出標本中的EBV-DNA,滿足臨床診斷、 治療需要。
【 參考值】
陰性 (熒光探針雜交PCR技術)
【臨床意義】
1.可快速檢測血液、腦脊液、組織、尿液中的EB病毒,為EB病毒感染提供直接證據(jù)。
2.EB病毒臨床上與鼻咽癌傳染性單核細胞增多癥、霍奇金病等的發(fā)病密切相關。
【注意事項】
1.檢測標本可采用EDTA抗凝全血、腦脊液、咽拭子、尿液、病變組織等。
2.標本采集時嚴格按無菌操作,并及時送檢。
三 RNA病毒測定
丙型肝炎病毒RNA(HCV-RNA)檢測
丙型肝炎病毒是一種單鏈正股RNA病毒,引起丙型病毒性肝炎。丙型病毒性肝炎多因輸血或血制品而引起,在輸血者中還存在無癥狀的HCV攜帶者。
【參考值】
陰性(RT-PCR,熒光定量PCR技術)
【臨床意義】
1.有助于HCV感染的早期診斷。
2.HCV-RNA陽性提示HCV復制活躍,傳染性強。
3.HCV-RNA轉(zhuǎn)陰提示HCV復制受抑,預后較好。
4.連續(xù)觀察HCV-RNA,結合抗-HCV的動態(tài)變化,可作為丙肝的預后判斷和干擾素等藥物療效的評價指標。
【注意事項】
1.標本可用血清或血漿,用無菌注射針頭抽取靜脈血2~3ml于無菌肝功管或EDTA抗凝管中送檢。避免肝素抗凝,避免反復凍融。
2.標本室溫放置不超過4小時。
3.溶血、高膽紅素標本影響檢測結果。
參 考 文 獻
[1]楊振,祁自柏,李河民.病毒基因檢測技術的 發(fā)展趨勢. 《 中國生物制品學雜志》,2006年01期.
[2]徐麗.利用基因工程進行PHB相關基因的克隆和煙草轉(zhuǎn)化[D].山東師范大學,2000年.
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