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高中生物必修1葉綠體色素的提取和分離實驗知識點

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  “葉綠體中色素的提取和分離”是高中生物教材中的一個關鍵實驗,有哪些知識點需要掌握?下面是學習啦小編給大家?guī)淼母咧猩锉匦?葉綠體色素的提取和分離實驗知識點,希望對你有幫助。

  高中生物必修1葉綠體色素的提取和分離實驗知識點

  1、原理:(1)葉綠體中的色素能溶解在有機溶劑無水乙醇(或丙酮)中,所以用無水乙醇可提取葉綠體中的色素。(2)不同的色素在層析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子隨層析液在濾紙條上擴散得快,溶解度低的色素分子隨層析液在濾紙條上擴散得慢,因而可用層析液將不同色素分離。

  3、結果分析:①從色素帶的寬度可知色素含量的多少依次為:葉綠素a>葉綠素b>葉黃素>胡蘿卜素; ②從色素帶的位置可知色素在層析夜中溶解度大小依次是:胡蘿卜素>葉黃素>葉綠素a>葉綠素b; ③在濾紙上距離最近的兩條色素帶是葉綠素a 與葉綠素b ,距離最遠的兩條色素帶是胡蘿卜素與葉黃素。

  4、注意事項:(1)裁取定性濾紙時,注意雙手盡量不要接觸紙面,以免手上的油脂或其他臟物污染濾紙。 (2)根據(jù)燒杯的高度制備濾紙條,讓濾紙條長度高出燒杯1cm ,高出的部分做直角彎折。

  (3)畫濾液細線時,用力要均勻,速度要適中。

  (4)研磨要迅速、充分。a.因為丙酮容易揮發(fā);b.為了使葉綠體完全破裂.從而能提取較多的色素;

  c.葉綠素極不穩(wěn)定,能被活細胞中的葉綠素酶水解而被破壞。

  (5)制備濾紙條時,要將濾紙條的一端剪去兩角,這樣可以使色素在濾紙條上擴散均勻,便于觀察實驗結果。

  5、實驗創(chuàng)新:在本實驗中在圓形濾紙中央點上葉綠體色素的提取液進行層析,會得到近似同心的四個色素環(huán),由內(nèi)到外依次是黃綠色、藍綠色、黃色、橙黃色。

  高中生物必修1葉綠體色素的提取和分離實驗常見問題

  一、 為什么要選新鮮綠色的幼嫩葉片?

  因為葉綠色含N﹑Mg,而老葉中這兩種礦質元素很多已經(jīng)分解轉移,所以鮮綠色的幼葉中葉綠素的含量高,適合于實驗.

  二、 制備濾紙條要剪去兩角

  實驗中需將濾紙條的一端剪去兩角,為什么這樣做,如果不會怎么樣呢? 原來若不剪去濾紙條的兩角,色素帶的兩邊和中間不是在一條直線上。這是由于濾紙條兩邊水分子可以向三個方向散失,向上“跑”的速度快。而濾紙條中間的水分子只能向兩個方向散失,分別是向內(nèi)和向外,因而會“跑”得慢一些。而現(xiàn)在剪去濾紙條的兩個角,可以在一定程度上加快中間色素的擴散速 度,減慢兩邊色素的擴散速度,從而真正意義上使這些色素從同一起點隨層析液擴散.

  三、為什么研磨時加無水乙醇或丙酮?

  因為色素是有機物,根據(jù)相似相容性原理,無水乙醇或丙酮能溶解色素

  四、為什么加入少許二氧化硅?

  在提取色素的過程中,要加人少許二氧化硅。原來是為了研磨得充分。二氧化硅就是石英沙子,研磨時可以增大強度,加快細胞和葉綠體的破裂,而使葉綠體中的色素釋放出來。

  五、為什么加入少許碳酸鈣?

  在提取色素的過程中,要加人少許碳酸鈣。原來是為了防止在研磨時葉綠體中的色素受到破壞。葉綠體中的色素原本所處的環(huán)境具微堿性。在實驗中,研磨會使細胞結構遭到破壞,細胞液中有機酸流出,酸性的細胞液就會接觸到葉綠體中的色素,致使葉綠素的分子結構遭到破壞,使葉綠素失鎂,呈黃褐色,如同我們看到到腌制的黃瓜會變色一樣,而碳酸鈣是強堿弱酸鹽,碳酸鈣在水中的溶解度很小,但還是有一部分得到溶解,中和細胞液的酸性,制造了一個弱堿環(huán)境,保護了色素。

  六、為什么用單層尼龍布過濾?

  在過濾時,漏斗基部放一塊單層尼龍布,老教材中是用濾紙來過濾的。過濾的目的是去掉不需要的雜質如破碎的細胞、二氧化硅、碳酸鈣等,相對而言,單層尼龍布可以讓色素溶液更好地通過效果比濾紙要好。

  高中生物必修1實驗知識點

  1、還原糖的檢測

  (1)材料的選?。哼€原糖含量高,白色或近于白色,如蘋果,梨,白蘿卜。

  (2)試劑:斐林試劑(甲液:0.1g/mL的NaOH溶液,乙液:0.05g/mL的CuSO4溶液),現(xiàn)配現(xiàn)用。

  (3)步驟:取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL(斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入)→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化(白色→淺藍色→磚紅色)

  ★模擬尿糖的檢測

  1、取樣:正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

  2、檢測方法:斐林試劑(水浴加熱)或班氏試劑或尿糖試紙

  3、結果:(用斐林試劑檢測)試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液,未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。

  4、分析:因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖,與斐林試劑發(fā)生反應產(chǎn)生磚紅色沉淀,而正常人尿液中無還原糖,所以沒有發(fā)生反應。

  2、脂肪的檢測

  (1)材料的選?。汉玖吭礁叩慕M織越好,如花生的子葉。

  (2)步驟: 制作切片(切片越薄越好)將最薄的花生切片放在載玻片中央

  染色(滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分數(shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精)

  制作裝片(滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片)

  鏡檢鑒定(顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒)

  3、蛋白質的檢測

  (1)試劑:雙縮脲試劑(A液:0.1g/mL的NaOH溶液,B液:0.01g/mL的CuSO4溶液)

  (2)步驟:試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL,搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴,搖勻→觀察顏色變化(紫色)
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高中生物必修1葉綠體色素的提取和分離實驗知識點

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