慢性粒細(xì)胞白血病染色體核型分析及其臨床意義
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作者：楊頡 劉竹珍 吳春梅 趙洪國 陳兵 管洪在
【摘要】 目的 探討慢性粒細(xì)胞白血?。–ML）不同病期染色體核型特點(diǎn)及其臨床意義。方法 采用R顯帶技術(shù)對(duì)124例CML病人進(jìn)行了常規(guī)染色體核型分析，并動(dòng)態(tài)觀察部分病人病程進(jìn)展中染色體核型的變化。結(jié)果124例病人中，Ph染色體陽性(Ph+)占93.55％(116/124)，Ph染色體陰性（Ph-）占6.45％（8/124）。Ph+病人中，94.83％(110/116)為典型Ph染色體易位，即t(9;22)(q34;q11)；5.17％(6/116)為變異型Ph染色體。11.21%（13/116）的Ph+病人出現(xiàn)額外染色體，其中慢性期、加速期和急變期額外染色體的檢出率分別為7.48%(8/107)、33.33%（1/3）和66.67%（4/6）,加速期和急變期額外染色體的檢出率明顯高于慢性期(χ2=19.285，P<0.01)。額外染色體以+8、2Ph、-21和i（17q）多見。個(gè)別病例同時(shí)存在多個(gè)異?？寺。嘁娪贑ML急變期。結(jié)論 CML病人病程中繼發(fā)額外染色體的異常改變與其病程進(jìn)展密切相關(guān)，染色體核型分析對(duì)CML的診斷、治療及預(yù)后判斷具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】 白血病，髓樣，慢性；費(fèi)城染色體；額外染色體；核型分析
慢性粒細(xì)胞白血病(CML)是起源于多能干細(xì)胞的惡性骨髓增殖性疾病。90%以上CML病人白血病細(xì)胞中有恒定的、特征性的Ph染色體，其中絕大多數(shù)為典型易位即t(9;22)(q34;q11)，少數(shù)病人可有變異易位（包括簡單變異易位和復(fù)雜易位）。隨著病情進(jìn)展，加速期和急變期病人可發(fā)生染色體核型演變，即出現(xiàn)Ph染色體以外的克隆性染色體異常[1]。染色體核型分析對(duì)CML的診斷、治療、病情監(jiān)測及預(yù)后判斷具有重要的價(jià)值[2]?，F(xiàn)將124例CML病人染色體核型分析結(jié)果報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
124例CML病人為青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬各醫(yī)院門診及住院治療的病人，其中男 76例，女48例；年齡13～74歲，平均42歲。慢性期 114例，加速期3例，急變期7例（3例初診時(shí)為慢性期，分別于5個(gè)月～3年后急變）。CML的診斷和分期參照文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)[3]。
1.2 染色體分析方法
采用骨髓細(xì)胞短期培養(yǎng)法（24 h）或外周血不加 PHA的短期培養(yǎng)法制備染色體標(biāo)本，然后采用熱處理姬姆薩R顯帶技術(shù)進(jìn)行核型分析，113例病人分析10～20個(gè)分裂中期細(xì)胞，11例病人分析細(xì)胞數(shù)少于10個(gè)。核型異常參照人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制(ISCNI991)中的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行描述。124例CML病人共做 148例次染色體檢查，其中大多數(shù)病例僅做 1次，部分病例作了2～3次檢查。
2 結(jié)果
2.1 染色體的核型特點(diǎn)
本文124例病人中，Ph染色體陽性(Ph+)116例(占93.55％)，Ph染色體陰性(Ph-)8例(占6.45％)。其中慢性期病人中有107例Ph+(占86.29%)，3例加速期病人均為Ph+(占2.42%)，急變期病人中6例Ph+(占4.84%)。 Ph+病人中，94.83％(110/116)為典型 Ph染色體易位，即t(9;22)(q34;q11)，5.17％(6/116)為變異型染色體易位，如t(13;22)(q33;q11)、t(11;22)(p15;q11)、t(9;22;18)(q34;q11;q21)和t(1;22;7)(p36;q11;q22)等。
2.2 染色體核型演變特點(diǎn)
116例Ph+病人中有13例（11.21%）出現(xiàn)額外染色體，其中8例為慢性期病人，占慢性期病人總數(shù)的7.48%(8/107)；1例為加速期病人，占加速期病人總數(shù)的33.33%（1/3）；急變期病人4例，占急變期病人總數(shù)的66.67%（4/6），加速期和急變期額外染色體的檢出率明顯高于慢性期(χ2=19.285，P<0.01)，額外染色體以+8、2Ph、-21和i（17q）多見。3例病人同時(shí)存在2個(gè)異?？寺。?例病人同時(shí)存在3個(gè)異?？寺。@些病人均多見于急變期。
3 討論
CML是一種造血干細(xì)胞的高度異質(zhì)性疾病，Ph染色體是其最特異的染色體異常，由此而產(chǎn)生的bcr/abl基因重排是CML較為特征性的分子標(biāo)志，也是客觀準(zhǔn)確地確定CML的主要依據(jù)[1]。文獻(xiàn)報(bào)道，大約93％的CML病人Ph染色體陽性，7%的病人Ph染色體陰性。我們所檢測的124例病人中Ph染色體陽性病人占93.55％，陰性病人占6.45%，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4]。對(duì)于Ph-的CML可進(jìn)一步分為Ph(-)bcr?abl(+)和Ph(-)bcr?abl(-)，前者仍屬于Ph+的CML，后者可能并非真正的CML，而是不典型的其他骨髓增殖性疾病[5]。由此可見，染色體及融合基因的檢測不僅有助于CML的診斷和鑒別診斷，而且可以對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)分型，細(xì)胞遺傳學(xué)分型對(duì)CML的治療具有重要的臨床價(jià)值。
有資料顯示，在Ph+的CML中，大約有94%病人有典型的Ph易位，而僅有約6%病人發(fā)生變異型Ph染色體易位，包括簡單變異易位（22號(hào)與非9號(hào)之間的易位）和復(fù)雜變異易位（3條或更多條染色體易位）。在變異易位的病例中除Y染色體外，所有其他染色體均可被累及[6,7]。本研究結(jié)果與上述文獻(xiàn)結(jié)果基本一致，大約94.83％的CML病人為典型 Ph染色體易位，5.17％為變異易位，如t(13;22)(q33;q11)、t(11;22)(p15;q11)、t(9;22;18)(q34;q11;q21)和t(1;22;7)(p36;q11;q22)等。簡單易位的分子生物學(xué)研究結(jié)果顯示，位于9號(hào)染色體長臂上的abl癌基因總是受累，都存在9q34和22q21的易位，表明簡單變異易位實(shí)際上都存在著 9q34和 22q21的易位，也就是說所有的簡單變異型 Ph染色體都可以看作是一定的檢測手段檢測不出來的復(fù)雜變異型 Ph染色體[8,9]。由此可見，變異易位和復(fù)雜易位都有共同的分子病理學(xué)改變，因此二者在臨床、血液學(xué)表現(xiàn)和預(yù)后特征等方面幾乎沒有區(qū)別。
一般認(rèn)為，在CML急變時(shí)70%的病人常出現(xiàn)額外染色體的改變，最多見的改變依次為+8, 2Ph和i(17q)。CORTES等[9]報(bào)道，慢性期、加速期和急變期CML病人核型演變的發(fā)生率分別為7.5%、40.0%、80.0%。本文CML病人慢性期、加速期和急變期核型演變的發(fā)生率分別為10.28%、66.67%和83.33%，與文獻(xiàn)基本相似。本文還顯示存在2個(gè)或3個(gè)異?？寺≌咧饕娪诩弊兤?，這說明染色體核型演變主要和CML病情進(jìn)展相關(guān)。最常見的額外染色體異常依次為+8、2Ph、-21和i（17q），三者可單獨(dú)或聯(lián)合出現(xiàn)，以+8合并2Ph最多見。另外，我們的臨床隨訪還顯示，部分病人檢出額外染色體異常時(shí)，臨床上尚無急變征象，表明核型演變往往和急變同時(shí)或更早發(fā)生。因此，CML病程中監(jiān)測染色體核型的改變對(duì)預(yù)測CML病情進(jìn)展及預(yù)后判斷有一定價(jià)值。
一般而言，Ph染色體存在于CML的整個(gè)病程中，常規(guī)化療對(duì)其無明顯影響。但近來研究顯示，Ph染色體的消長與治療有一定的相關(guān)性，部分病人經(jīng)骨髓移植或某些化療藥物治療后Ph+細(xì)胞的百分比有所下降，少數(shù)甚至完全轉(zhuǎn)陰[10]。因此，CML病程中進(jìn)行染色體核型監(jiān)測還有助于判斷療效。
【參考文獻(xiàn)】
[1]許文榮,王建中. 臨床血液學(xué)與檢驗(yàn) [M]. 第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社, 2007:268?272.
[2]姜道滋,陳志妹,樓基余,等. 1 193例慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞及分子遺傳學(xué)分析[J]. 中華血液學(xué)雜志, 2007,28:1?5.
[3]張之南. 血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M]. 第2版.北京:科學(xué)技術(shù)出版社, 1998: 219?221.
[4]HEIM S, BILLSTROM R, KRISTOFFERSSON U, et al. Variant Ph translocation in chronic myeloid leukemia[J]. Cancer Genet Cytogenent, 1985,18:215?227.
[5]薛永權(quán),過宇,顧建明,等. Ph染色體陰性和少見Ph易位慢性粒細(xì)胞白血病的細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)研究[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志, 1993,73:209?212.
[6]AGSSAD M, OREB G, ZABED L. Karyotype analysis in chronic myelogenous leukemia. A three?year experience at the American University of Beirut Medical Center[J]. J Med Liban, 1998,46:16?19.
[7]HAGEMEIJER A, BARTRAM C R, SMITE M E, et al. Is the chromsomeal region 9q34 always involved in variant of the Ph translocation[J]? Cancer Genet Cytogenet, 1984,13:1?16.
[8]ISHIHARA T, MINAMIHISAMATSU M. The Philadephia chromosome, considerations based on studies of variant Ph translocations[J]. Cancer Genet Cytogenet, 1988,32:75?92.
[9]CORTES J E, TALPAZ M, GILES F, et al. Prognostic significance of cytogenetic clonal evolution in patients with chro?nic myelogenous leukemia on imatinib mesylate therapy[J]. Blood, 2003,101:3794?3800.
[10]王術(shù)國,管洪在,扈新花，等. 慢性粒細(xì)胞白血病smac和survivin基因表達(dá)及意義[J]. 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2008,44(1):51?53.
【摘要】 目的 探討慢性粒細(xì)胞白血?。–ML）不同病期染色體核型特點(diǎn)及其臨床意義。方法 采用R顯帶技術(shù)對(duì)124例CML病人進(jìn)行了常規(guī)染色體核型分析，并動(dòng)態(tài)觀察部分病人病程進(jìn)展中染色體核型的變化。結(jié)果124例病人中，Ph染色體陽性(Ph+)占93.55％(116/124)，Ph染色體陰性（Ph-）占6.45％（8/124）。Ph+病人中，94.83％(110/116)為典型Ph染色體易位，即t(9;22)(q34;q11)；5.17％(6/116)為變異型Ph染色體。11.21%（13/116）的Ph+病人出現(xiàn)額外染色體，其中慢性期、加速期和急變期額外染色體的檢出率分別為7.48%(8/107)、33.33%（1/3）和66.67%（4/6）,加速期和急變期額外染色體的檢出率明顯高于慢性期(χ2=19.285，P<0.01)。額外染色體以+8、2Ph、-21和i（17q）多見。個(gè)別病例同時(shí)存在多個(gè)異?？寺。嘁娪贑ML急變期。結(jié)論 CML病人病程中繼發(fā)額外染色體的異常改變與其病程進(jìn)展密切相關(guān)，染色體核型分析對(duì)CML的診斷、治療及預(yù)后判斷具有重要意義。
【關(guān)鍵詞】 白血病，髓樣，慢性；費(fèi)城染色體；額外染色體；核型分析
慢性粒細(xì)胞白血病(CML)是起源于多能干細(xì)胞的惡性骨髓增殖性疾病。90%以上CML病人白血病細(xì)胞中有恒定的、特征性的Ph染色體，其中絕大多數(shù)為典型易位即t(9;22)(q34;q11)，少數(shù)病人可有變異易位（包括簡單變異易位和復(fù)雜易位）。隨著病情進(jìn)展，加速期和急變期病人可發(fā)生染色體核型演變，即出現(xiàn)Ph染色體以外的克隆性染色體異常[1]。染色體核型分析對(duì)CML的診斷、治療、病情監(jiān)測及預(yù)后判斷具有重要的價(jià)值[2]?，F(xiàn)將124例CML病人染色體核型分析結(jié)果報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
124例CML病人為青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬各醫(yī)院門診及住院治療的病人，其中男 76例，女48例；年齡13～74歲，平均42歲。慢性期 114例，加速期3例，急變期7例（3例初診時(shí)為慢性期，分別于5個(gè)月～3年后急變）。CML的診斷和分期參照文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)[3]。
1.2 染色體分析方法
采用骨髓細(xì)胞短期培養(yǎng)法（24 h）或外周血不加 PHA的短期培養(yǎng)法制備染色體標(biāo)本，然后采用熱處理姬姆薩R顯帶技術(shù)進(jìn)行核型分析，113例病人分析10～20個(gè)分裂中期細(xì)胞，11例病人分析細(xì)胞數(shù)少于10個(gè)。核型異常參照人類細(xì)胞遺傳學(xué)國際命名體制(ISCNI991)中的有關(guān)規(guī)定進(jìn)行描述。124例CML病人共做 148例次染色體檢查，其中大多數(shù)病例僅做 1次，部分病例作了2～3次檢查。
2 結(jié)果
2.1 染色體的核型特點(diǎn)
本文124例病人中，Ph染色體陽性(Ph+)116例(占93.55％)，Ph染色體陰性(Ph-)8例(占6.45％)。其中慢性期病人中有107例Ph+(占86.29%)，3例加速期病人均為Ph+(占2.42%)，急變期病人中6例Ph+(占4.84%)。 Ph+病人中，94.83％(110/116)為典型 Ph染色體易位，即t(9;22)(q34;q11)，5.17％(6/116)為變異型染色體易位，如t(13;22)(q33;q11)、t(11;22)(p15;q11)、t(9;22;18)(q34;q11;q21)和t(1;22;7)(p36;q11;q22)等。
2.2 染色體核型演變特點(diǎn)
116例Ph+病人中有13例（11.21%）出現(xiàn)額外染色體，其中8例為慢性期病人，占慢性期病人總數(shù)的7.48%(8/107)；1例為加速期病人，占加速期病人總數(shù)的33.33%（1/3）；急變期病人4例，占急變期病人總數(shù)的66.67%（4/6），加速期和急變期額外染色體的檢出率明顯高于慢性期(χ2=19.285，P<0.01)，額外染色體以+8、2Ph、-21和i（17q）多見。3例病人同時(shí)存在2個(gè)異?？寺。?例病人同時(shí)存在3個(gè)異?？寺。@些病人均多見于急變期。
3 討論
CML是一種造血干細(xì)胞的高度異質(zhì)性疾病，Ph染色體是其最特異的染色體異常，由此而產(chǎn)生的bcr/abl基因重排是CML較為特征性的分子標(biāo)志，也是客觀準(zhǔn)確地確定CML的主要依據(jù)[1]。文獻(xiàn)報(bào)道，大約93％的CML病人Ph染色體陽性，7%的病人Ph染色體陰性。我們所檢測的124例病人中Ph染色體陽性病人占93.55％，陰性病人占6.45%，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[4]。對(duì)于Ph-的CML可進(jìn)一步分為Ph(-)bcr?abl(+)和Ph(-)bcr?abl(-)，前者仍屬于Ph+的CML，后者可能并非真正的CML，而是不典型的其他骨髓增殖性疾病[5]。由此可見，染色體及融合基因的檢測不僅有助于CML的診斷和鑒別診斷，而且可以對(duì)其進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)分型，細(xì)胞遺傳學(xué)分型對(duì)CML的治療具有重要的臨床價(jià)值。
有資料顯示，在Ph+的CML中，大約有94%病人有典型的Ph易位，而僅有約6%病人發(fā)生變異型Ph染色體易位，包括簡單變異易位（22號(hào)與非9號(hào)之間的易位）和復(fù)雜變異易位（3條或更多條染色體易位）。在變異易位的病例中除Y染色體外，所有其他染色體均可被累及[6,7]。本研究結(jié)果與上述文獻(xiàn)結(jié)果基本一致，大約94.83％的CML病人為典型 Ph染色體易位，5.17％為變異易位，如t(13;22)(q33;q11)、t(11;22)(p15;q11)、t(9;22;18)(q34;q11;q21)和t(1;22;7)(p36;q11;q22)等。簡單易位的分子生物學(xué)研究結(jié)果顯示，位于9號(hào)染色體長臂上的abl癌基因總是受累，都存在9q34和22q21的易位，表明簡單變異易位實(shí)際上都存在著 9q34和 22q21的易位，也就是說所有的簡單變異型 Ph染色體都可以看作是一定的檢測手段檢測不出來的復(fù)雜變異型 Ph染色體[8,9]。由此可見，變異易位和復(fù)雜易位都有共同的分子病理學(xué)改變，因此二者在臨床、血液學(xué)表現(xiàn)和預(yù)后特征等方面幾乎沒有區(qū)別。
一般認(rèn)為，在CML急變時(shí)70%的病人常出現(xiàn)額外染色體的改變，最多見的改變依次為+8, 2Ph和i(17q)。CORTES等[9]報(bào)道，慢性期、加速期和急變期CML病人核型演變的發(fā)生率分別為7.5%、40.0%、80.0%。本文CML病人慢性期、加速期和急變期核型演變的發(fā)生率分別為10.28%、66.67%和83.33%，與文獻(xiàn)基本相似。本文還顯示存在2個(gè)或3個(gè)異?？寺≌咧饕娪诩弊兤?，這說明染色體核型演變主要和CML病情進(jìn)展相關(guān)。最常見的額外染色體異常依次為+8、2Ph、-21和i（17q），三者可單獨(dú)或聯(lián)合出現(xiàn)，以+8合并2Ph最多見。另外，我們的臨床隨訪還顯示，部分病人檢出額外染色體異常時(shí)，臨床上尚無急變征象，表明核型演變往往和急變同時(shí)或更早發(fā)生。因此，CML病程中監(jiān)測染色體核型的改變對(duì)預(yù)測CML病情進(jìn)展及預(yù)后判斷有一定價(jià)值。
一般而言，Ph染色體存在于CML的整個(gè)病程中，常規(guī)化療對(duì)其無明顯影響。但近來研究顯示，Ph染色體的消長與治療有一定的相關(guān)性，部分病人經(jīng)骨髓移植或某些化療藥物治療后Ph+細(xì)胞的百分比有所下降，少數(shù)甚至完全轉(zhuǎn)陰[10]。因此，CML病程中進(jìn)行染色體核型監(jiān)測還有助于判斷療效。
【參考文獻(xiàn)】
[1]許文榮,王建中. 臨床血液學(xué)與檢驗(yàn) [M]. 第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社, 2007:268?272.
[2]姜道滋,陳志妹,樓基余,等. 1 193例慢性粒細(xì)胞白血病細(xì)胞及分子遺傳學(xué)分析[J]. 中華血液學(xué)雜志, 2007,28:1?5.
[3]張之南. 血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)[M]. 第2版.北京:科學(xué)技術(shù)出版社, 1998: 219?221.
[4]HEIM S, BILLSTROM R, KRISTOFFERSSON U, et al. Variant Ph translocation in chronic myeloid leukemia[J]. Cancer Genet Cytogenent, 1985,18:215?227.
[5]薛永權(quán),過宇,顧建明,等. Ph染色體陰性和少見Ph易位慢性粒細(xì)胞白血病的細(xì)胞遺傳學(xué)及分子生物學(xué)研究[J]. 中華醫(yī)學(xué)雜志, 1993,73:209?212.
[6]AGSSAD M, OREB G, ZABED L. Karyotype analysis in chronic myelogenous leukemia. A three?year experience at the American University of Beirut Medical Center[J]. J Med Liban, 1998,46:16?19.
[7]HAGEMEIJER A, BARTRAM C R, SMITE M E, et al. Is the chromsomeal region 9q34 always involved in variant of the Ph translocation[J]? Cancer Genet Cytogenet, 1984,13:1?16.
[8]ISHIHARA T, MINAMIHISAMATSU M. The Philadephia chromosome, considerations based on studies of variant Ph translocations[J]. Cancer Genet Cytogenet, 1988,32:75?92.
[9]CORTES J E, TALPAZ M, GILES F, et al. Prognostic significance of cytogenetic clonal evolution in patients with chro?nic myelogenous leukemia on imatinib mesylate therapy[J]. Blood, 2003,101:3794?3800.
[10]王術(shù)國,管洪在,扈新花，等. 慢性粒細(xì)胞白血病smac和survivin基因表達(dá)及意義[J]. 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2008,44(1):51?53.